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轉(zhuǎn)換生長因子的樣本處理及保存方法
日期:2024-11-22 01:47
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摘要:
轉(zhuǎn)換生長因子的樣本處理及保存方法
轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是屬于一組新近發(fā)現(xiàn)的調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化的TGF-β超家族。生物樣品中的TGF-β通常以無活性的形式存在。在檢測TGF-β活性前必須活化以釋放TGF-β的活性。活化的方法主要有兩種:加熱活化和酸化活化。
加熱活化:在TGF-β樣品中加入BSA到終濃度50~100μg/ml,將微量離心管置80℃水浴中8分鐘活化TGF-β,置冰上冷卻5分鐘后檢測活性。
酸化活化:用5N HCl將TGF-β樣品的pH調(diào)節(jié)到2.0~2.5,室溫放置10分鐘活化TGF-β;再...
轉(zhuǎn)換生長因子的樣本處理及保存方法
轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是屬于一組新近發(fā)現(xiàn)的調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和分化的TGF-β超家族。生物樣品中的TGF-β通常以無活性的形式存在。在檢測TGF-β活性前必須活化以釋放TGF-β的活性。活化的方法主要有兩種:加熱活化和酸化活化。
加熱活化:在TGF-β樣品中加入BSA到終濃度50~100μg/ml,將微量離心管置80℃水浴中8分鐘活化TGF-β,置冰上冷卻5分鐘后檢測活性。
酸化活化:用5N HCl將TGF-β樣品的pH調(diào)節(jié)到2.0~2.5,室溫放置10分鐘活化TGF-β;再用5N NaOH(1mol/L pH7.4 Hepes緩沖液配制)將pH調(diào)節(jié)到pH7.5。