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單克隆抗體選擇性培養
日期：2024-11-21 09:02
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摘要：
1975年分子生物學家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術的基礎上，創建立雜交瘤技術，他們把可在體外培養和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經抗原**后的純系小鼠B細胞融合，成為雜交細胞系，既具有瘤細胞易于在體外無限增殖的特性，又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細胞培養，可形成單細胞系，即單克隆。利用培養或小鼠腹腔接種的方法，便能得到大量的、高濃度的、非常均一的抗體，其結構、氨基酸順序、特異性等都是一致的，而且在培養過程中，只要沒有變異，不同時間所分泌的抗體都能保持同樣的結構與機能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。
這項新技術從根本上解決了在抗體制備中長期存在的特異性和可重復性問題，可用于探討①蛋白質的精細結構；②**細胞亞群的表面新抗原；③組織相容性抗原；④**和**的放射**（或酶**）分析；⑤腫瘤的定位和分類；⑥純化微生物和寄生蟲抗原；⑦****和與**結合的**-化學療法 (“導彈”療法,利用單克隆抗體與靶細胞特異性結合，將**帶至病灶部位。因此，單克隆抗體可直接用于人類**的診斷、預防、**以及**機制的研究，為人類惡性腫瘤的**診斷與****開辟了廣闊前景。
選擇性培養的目的是篩選融合的雜交瘤細胞，一般采用HAT選擇性培養基。在HAT培養基中，未融合的骨髓瘤細胞因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶，不能利用補救途徑合成DNA而死亡。 未融合的**細胞雖具有次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶，但其本身不能在體外長期存活也逐漸死亡。 只有融合的雜交瘤細胞由于從脾細胞獲得了次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉移酶，并具有骨髓瘤細胞能無限增殖的特性，因此能在HAT培養基中存活和增殖。
